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技術(shù)文章

Technical articles

2014
4-9

豬病檢測(cè)抽樣標(biāo)準(zhǔn)的幾個(gè)問題
一、抽樣多少才比較準(zhǔn)確？一個(gè)檢測(cè)的群體要抽取多少比例的樣本進(jìn)行檢測(cè)才有代表性，其結(jié)果可信度高呢？現(xiàn)實(shí)中有不少豬場(chǎng)是根據(jù)群體百分率來取樣，但這種做法不正確。正確做法應(yīng)根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)可信度取樣。美國(guó)愛德仕公司馬祥表示，要檢測(cè)的數(shù)據(jù)可信度高，參考價(jià)值大，必須按照規(guī)定抽取一定的樣品進(jìn)行檢測(cè)。愛德仕公司提供的建議是按照95%置信區(qū)間取樣。每個(gè)檢測(cè)群體大概需要30頭。樊福好博士表示，大約每個(gè)群體抽取樣品28-30頭基本達(dá)到可信度95%，已經(jīng)有足夠代表性。二、一般商品豬場(chǎng)需要對(duì)哪些疫病進(jìn)行監(jiān)測(cè)...
2014
4-1

恒遠(yuǎn)告訴您前列腺素A的作用是什么
前列腺素a是什么，它對(duì)人體又有什么作用呢？讓恒遠(yuǎn)公司的吳來告訴大家。前列腺素（prostaglandin，PG）存在于動(dòng)物和人體中的一類不飽和脂肪酸組成的具有多種生理作用的活性物質(zhì)。zui早發(fā)現(xiàn)存在于人的精液中，當(dāng)時(shí)以為這一物質(zhì)是由前列腺釋放的，因而定名為前列腺素?，F(xiàn)已證明精液中的前列腺素主要來自精囊，除之全身許多組織細(xì)胞都能產(chǎn)生前列腺素。前列腺素（PG）在體內(nèi)由花生四烯酸所合成，結(jié)構(gòu)為一個(gè)環(huán)和兩條側(cè)鏈構(gòu)成的20碳不飽和脂肪酸。按其結(jié)構(gòu)，前列腺素分為A、B、C、D、E、F、G...
2014
3-25

人血漿中緩激肽的MS定量檢測(cè)方法
緩激肽是一種含有9種氨基酸的生理和藥理活性肽，由蛋白質(zhì)的激肽基團(tuán)衍生而來。激肽是可以促使血管舒張、血管通透性增強(qiáng)、一氧化氮釋放和花生四烯酸流動(dòng)的效應(yīng)因子。它是血壓、腎功能和心臟功能的重要調(diào)節(jié)因子，還參與炎癥反應(yīng)。緩激肽可引起血管擴(kuò)張，從而導(dǎo)致血壓降低。因此，對(duì)這種激素肽的變化進(jìn)行高靈敏度、高選擇性和高準(zhǔn)確度地定量，并將其作為疾病進(jìn)展或藥物治療的評(píng)估指標(biāo)，將會(huì)極為有利。盡管以往都是通過配體結(jié)合試驗(yàn)(LBAs)對(duì)生物制劑進(jìn)行定量分析，但在過去幾年中利用LC-MS/MS分析大分子已...
2014
3-21

核酸分離與純化的原則
材料與方法的選擇(一)材料與方法的選擇臨床常見的標(biāo)本有血液，尿液，唾液，組織及培養(yǎng)細(xì)胞等；核酸分離與純化的方法非常多，如何恰當(dāng)?shù)厥占c準(zhǔn)備材料，選擇適宜的分離與純化方法是一個(gè)首要的問題。首先我們應(yīng)當(dāng)明確核酸的分離與純化并不是zui終的目的，不同的實(shí)驗(yàn)研究與應(yīng)用對(duì)核酸的產(chǎn)量，完整性，純度和濃度可能有不同的要求；至于分離與純化核酸所需的時(shí)間與成本也往往需要考慮；在不影響核酸質(zhì)量的情況下，應(yīng)選擇安全無(wú)毒的試劑與方案。近年來，有關(guān)試劑盒的開發(fā)與自動(dòng)化儀器的使用，能批量制備核酸樣品，大...
2014
3-17

細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)原理
細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)原理細(xì)胞膜是一選擇性的生物膜，一般的生物染料如PI等不能穿過質(zhì)膜。當(dāng)細(xì)胞壞死時(shí)，質(zhì)膜不完整，PI就進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部，它可嵌入到DNA或RNA中，使壞死細(xì)胞著色，凋亡細(xì)胞和活細(xì)胞不著色。而一些活細(xì)胞染料由于為親脂性物質(zhì)，可跨膜進(jìn)入活細(xì)胞，因而可進(jìn)行活細(xì)胞染色。Hoechst33342是一種活性熒光染料且毒性較弱，它是雙苯并咪唑的一種衍生物。與DNA特異結(jié)合（主要結(jié)合于A-T）堿基區(qū)），顯示凋亡細(xì)胞和活細(xì)胞。凡是看到有凋亡小體的細(xì)胞都是凋亡細(xì)胞。細(xì)胞死亡根據(jù)其性質(zhì)、起源...
2014
3-11

動(dòng)物檢驗(yàn)檢疫中定量的核酸檢測(cè)技術(shù)
在動(dòng)物檢驗(yàn)檢疫中核酸檢測(cè)技術(shù)大多數(shù)無(wú)需要求定量，所以在這只作簡(jiǎn)單介紹。核酸檢測(cè)的定量化在人醫(yī)臨床和動(dòng)物疫病基礎(chǔ)研究中應(yīng)用較多，可用于病情評(píng)估、療效預(yù)測(cè)和觀察及預(yù)后判斷、疫病的病理分析，具有一定的應(yīng)用價(jià)值。核酸的定量檢測(cè)一般有以下兩種方法。(1)定量的核酸雜交技術(shù)此類技術(shù)以分支鏈DNA信號(hào)放大技術(shù)(branchedDNAsignalamplificationassay，bDNA)為典型代表，bDNA技術(shù)系美國(guó)Chiron公司的，屬于一種改良的核酸雜交技術(shù)，它定量的基本原理是樣品...
2014
3-7

上海恒遠(yuǎn)告知：抗磷脂抗體檢測(cè)方法
檢測(cè)APLAzui敏感試驗(yàn)是1983年介紹的ACLA的檢測(cè)，后來這種方法得到不斷改進(jìn)，血清、血漿均可用于分析。該方法即為酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)：用純心磷脂的無(wú)水乙醇溶液(50／11)包被聚苯乙烯反應(yīng)板，常規(guī)方法洗滌后，用10％的BSA封閉；加l：50稀釋的待測(cè)血清，37~C孵育30rain；洗板后，再分別加入HRP標(biāo)記的抗人γ(1：1500)、抗α(1：1000)、抗μ(1；8000)鏈的F(ab)2片段，37℃30min然后，OPD顯色，加終止液。492nm波長(zhǎng)測(cè)吸...
2014
3-3

ELISA常用結(jié)果判定的方法
1．定性測(cè)定(1)陽(yáng)性判定值法(cut-offvalue，CO值)：一般為陰性對(duì)照的平均A值加一個(gè)常數(shù)，試劑制備嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)化，要先計(jì)算出陽(yáng)性對(duì)照A值平均數(shù)和陰性對(duì)照A值平均數(shù)。標(biāo)本A值≥CO值即為陽(yáng)性。(2)抑制率法：在競(jìng)爭(zhēng)抑制法中結(jié)果可用抑制率表示。抑制率(％)＝(A陰性對(duì)照A-A待測(cè))／陰性對(duì)照X100％,一般以抑制率≥50％為陽(yáng)性2。半定量測(cè)定結(jié)果一般以滴度表示。將標(biāo)本連續(xù)稀釋后，進(jìn)行ELISA檢測(cè)，在陽(yáng)性臨界值以上的zui高稀釋度即為該標(biāo)本的“滴度”。3。定量測(cè)定即用己...

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